батофенантролин (4,7-Diphenyl-1,10-phenanthroline ) Германия C24H16N Мм 332.41 (100 мг -200 грн ) (1000 мг - 1500 грн) Цена на 12 09 2024 р
Опубліковано: 27.06.2012
Автор: Олег Зуляк Николаевич
продам
0684413077
батофенантролин (4,7-Diphenyl-1,10-phenanthroline ) Германия C24H16N Мм 332.41 ====
Определение железа по цветной реакции со спиртовым раствором батофенантролина
Принцип метода определения железа крови по цветной реакции со спиртовым раствором батофенантролина
Сывороточное железо восстанавливают тиогликолевой кислотой, белки
осаждают трихлоруксусной кислотой, в фильтрате устанавливают нужную
величину рН, добавляя ацетат натрия, и проводят цветную реакцию с
батофенантролином.
В связи с тем, что он в воде не растворяется, используют спиртовой раствор.
Необходимые реактивы для определения железа по цветной реакции
1. Кислота тиогликолевая, кислота трихлоруксусная, раствор 400 г/л.
2. Натрия ацетат, насыщенный раствор (в случае необходимости его
очищают от следов железа, растворяя 500 г в 1 л воды при 37 °С). К
прозрачной надосадочной жидкости добавляют раствор батофенантролина из
расчета 10 мл на 1 л и этиловый спирт в количестве, равном количеству
надосадочной жидкости; на холоде выпадают кристаллы CH3COONa · ЗН2О.
3. Батофенантролин, 40 мг в 100 мл этанола.
4. НСl 1 н раствор.
5. Калибровочный раствор железа: 100 мг мягкой железной проволоки
растворяют в 4 мл концентрированной НС1 и разводят до 1 л водой,
получается раствор, содержащий 100 мкг/мл. Из него разведением в 60 раз
получают раствор, содержащий 30 мкмоль/литр (1,67 мкг/л).
Учитывая, что метод определения очень чувствительный, необходимо принять
все меры, чтобы реактивы и посуда не содержали железа, присутствие
которого выявляется при постановке холостых проб. Посуду, в том числе
пробирки для взятия крови, необходимо обрабатывать разбавленной НС1;
должна использоваться только деионизированная или перегнанная в
стеклянной посуде вода; реактивы очищаются перекристаллизацией.
Ход определения железа по цветной реакции
К 0,7 мл сыворотки прибавляют 2 капли тиогликолевой кислоты,
взбалтывают, а затем еще 0,35 мл 1 н НС1, опять перемешивают и
прибавляют 0,2 мл раствора трихлоруксусной кислоты. Энергично
размешивают стеклянной палочкой в течение 45 секунд, а затем
центрифугируют при скорости 2500 об./мин. В пробирку с притертой пробкой
отбирают из надосадочной жидкости 0,7 мл, к которым прибавляют 0,6 мл
насыщенного раствора аммония ацетата и 0,7 мл раствора батофенантролина.
Окраска развивается за 20—30 секунд. Фотометрируют в кювете с длиной
оптического пути 1 сантиметр при длине волны 536 нм против холостой
пробы, в которой вместо сыворотки берут 0,7 мл воды. Одновременно
обрабатывают и калибровочную пробу, в которой вместо сыворотки
используют 0,7 мл калибровочного раствора, содержащего 30 мкмоль железа в
1 литре.
Расчет проводят по правилу пропорций.
Схожі оголошення